Искусственное осеменение в коневодстве


Jonathan F. Pycock

Успех программы искусственного осеменения (ИО) в коневодстве основывается на следующих факторах: Со стороны жеребца:

• Полное обследование жеребца на предмет пригодности к воспроизводству.

• Подтверждение приемлемого качества семени.

• Правильное охлаждение и хранение семени после взятия. Со стороны кобылы:

• Удовлетворительные результаты обследования на предмет годности к воспроизводству.

• Стимуляция овуляторного эструса.

• Точное предварительное определение времени овуляции.

• Правильный выбор времени осеменения по отношению к овуляции.

• Правильное хранение, оттаивание и обращение с семенем.

• Соблюдение правильной техники осеменения.

• После осеменения: повторное обследование, лечение.

• Точная диагностика жеребости на 14-16-й день после осеменения.

Владелец должен быть информирован о том, что ИО в коневодстве требует больших технических вложений и не является дешевой альтернативой естественной случке.

Жизненно необходимо хорошее взаимодействие между владельцем кобылы, владельцем жеребца и обслуживающими их ветеринарами.

Для успеха программы по искусственному осеменению следует четко соблюдать меры профилактики и гигиены, строго руководствуясь принятыми в той или иной стране правилами и законами по профилактике болезней животных, чтобы снизить риск распространения и передачи заболеваний. Каждая партия пересылаемого свежего или охлажденного семени должна иметь сопроводительную документацию, содержащую информацию о жеребце (идентификацию, данные о состоянии здоровья), название центра, осуществлявшего взятие семени, дату взятия и отправки и количество спермиев в отсылаемой дозе.

Перед началом программы по воспроизводству с использованием охлажденного или замороженного семени владелец кобыл должен быть информирован о трудностях, связанных с применением ИО, а также о том, что может служить хорошими показателями при искусственном осеменении. Многие владельцы кобыл считают, что, как только они решили пустить ту или иную кобылу в воспроизводство, она немедленно зажеребеет и на следующий год принесет живого жеребенка. Такое мнение в корне неверно, и важно, чтобы владелец осознавал возможности метода. При обычных обстоятельствах (т. е. когда кобыла плодовита, а качество семени хорошее), можно ожидать зажеребляемость в пределах от 55 до 70% из расчета на один цикл при осеменении охлажденным, и 35-50% — замороженным семенем. В конце случного сезона зажеребляемость может составить 50-90% (в среднем 75%). Конечно, часть кобыл теряет эмбрионы, поэтому выход деловых жеребят составляет около 65%.

Также важно знать о затратах, связанных с использованием ИО. Многие владельцы кобыл ожидают снижения расходов из-за того, что отпадает необходимость перевозить кобыл, и не учитывают, во что может обойтись получение и транспортировка семени, а также мониторинг полового цикла кобылы и само осеменение ее в оптимальные сроки.

Время осеменения. Переживаемость спермиев в половом тракте кобылы

Хорошо известно, что в половом тракте кобыл спермин при естественной случке могут сохранять свою жизнеспособность как длительное время — до 7 дней, так и весьма короткое -около 24 часов. Очевидно, что у большинства жеребцов хорошая оплодотворяющая способность семени сохраняется по крайней мере в течение двух суток. На переживаемость спермиев влияет метод хранения. Важно помнить, что существуют различные способы хранения семени, так как этот фактор оказывает существенное влияние на оптимальное время осеменения по отношению ко времени овуляции. Три метода хранения включают:

• Свежеполученное неохлажденное семя.

• Охлажденное.

• Замороженное.

Хранение свежеполученного неохлажденного семени

Семя, предназначенное для немедленного осеменения, используют неразбавленным, однако если предполагаемый интервал составляет более 10 минут, лучше пользоваться разбавителем. Если же такое семя должно храниться от 2 до 6 часов, следует удалить плазму путем центрифугирования (900 g при комнатной температуре): это позволяет дольше сохранить оплодотворяющую способность, что благоприятно для семени некоторых жеребцов. Желательно, чтобы семя при этом не подвергалось температурным колебаниям, поэтому хранить его можно в термосе. Контейнер для хранения при комнатной температуре (8-22С) должен быть свето- и воздухонепроницаемым.

Хранение и транспортировка охлажденного семени

Для предотвращения потерь энергии сперматозоидами в тех случаях, когда интервал между взятием и осеменением составляет свыше 6 часов, требуется охлаждение полученного семени. Свободный от секрета придаточных желез эякулят разбавляют подходящим разбавителем при температуре ЪТС. Под микроскопом, оборудованным столиком с подогревом, определяют подвижность спермиев.

Режим охлаждения приобретает критическое значение. Примерно 12 лет назад компания Гамильтон-Торн разработала специальный контейнер — эквитейнер — для транспортировки семени жеребцов. Он состоит из прочного, снабженного защелкой наружного контейнера и заключенных в него замороженных пакетов, изолирующего слоя, термобалластных мешков и регулятора температуры. Особенностью эквитейнера является то, что он способен обеспечивать постепенное, около 0,3°С в минуту, снижение температуры до тех пор, пока она не стабилизируется в пределах 4-6°С. Семя может храниться при этой температуре до трех суток. Такой режим охлаждения был разработан специально, после ряда экспериментальных исследований по определению переживаемости спермиев при различной скорости охлаждения. Режим охлаждения контролируется и поддерживается за счет замороженных пакетов, специальной медной пластины, помещенной между ними и семенем, и термобалласта объемом 60 мл, который окружает семя. Если общий объем семени и термобалласта находится в пределах 120-170 мл, охлаждение семени происходит в заданном режиме.

Автор специально столь подробно описывает здесь устройство эквитейнера, чтобы читателям стала понятна необходимость иметь специальное оборудование для получения семени оптимального качества после транспортировки. На рынке имеется большое число «клонов» эквитейнера. Некоторые из них значительно дешевле оригинала и, хотя нередко дают вполне приемлемые результаты, переживаемость спермиев при этом не является оптимальной. По мнению автора, до тех пор, пока не будут получены результаты, демонстрирующие эффективность продукции фирм-конкурентов, заводчикам следует рекомендовать к использованию именно оригинальную модель эквитейнера.

В Нидерландах для транспортировки охлажденного семени используют коробки из полистерена, в которые помещают по две тубы с семенем, каждая объемом по 15 мл. Эти полистереновые коробки затем упаковывают в картонные коробки, которые помещают в транспортный холодильник (при температуре 5’С). Такая система является эффективной и недорогой.

Семя некоторых жеребцов хорошо переносит транспортировку в охлажденном состоянии, тогда как семя других таким свойством не обладает. Поэтому необходимо определять устойчивость семени каждого жеребца-производителя к охлаждению и хранению до того, как доза семени будет отправлена заказчику. С этой целью эякулят смешивают с разбавителем (например, с разбавителем на основе нагретого и охлажденного обезжиренного молока) в соотношении 1:2, помещают в эквитейнер и затем определяют подвижность семени через каждые 12 часов. Так как доза спермиев в одном пакете должна содержать по меньшей мере 500 млн спермиев с прогрессивно-поступательным движением, степень разбавления можно варьировать (от 1:1 до 1:6) в зависимости от густоты полученного семени.

Определение предположительного времени овуляции

Во многих случаях предназначенные для искусственного осеменения кобылы содержатся в конюшне владельца, в связи с чем использование жеребца-пробника для выявления охоты бывает недоступно. Такая же ситуация возникает, если для удобства проведения осмотра кобылу помещают в денник ветеринарной клиники. Выявить охоту у кобылы в отсутствии пробника затруднительно, поэтому занимающийся воспроизводством ветеринар должен быть готов стимулировать и диагностировать эструс.

В течение случного периода у кобыл наблюдаются повторные половые циклы, каждый продолжительностью в среднем по 22 дня: 3-7 дней эструса сменяются 15-17 днями диэстру-са, во время которого в яичниках развивается желтое тело, вырабатывающее прогестерон, и кобыла отбивает жеребца. Исходя из вышеизложенного, при первичном осмотре во время случного сезона около трети всего поголовья кобыл находятся в охоте либо начинают приходить в охоту. Предсказание точного времени наступления овуляции является нелегким занятием, требующим учета ряда данных и составления обдуманного решения. Между тем знание времени овуляции крайне важно, так как оптимальным временем для искусственного осеменения охлажденным семенем является 24 часа до овуляции. При использовании замороженного семени идеально осеменять в период между 12 часами до и 6 часами после овуляции (см. ниже).

Диаметр фолликула, предовуляторное размягчение, изменение формы и утолщение его стенки служат показателями для определения времени предстоящей овуляции. Однако у некоторых кобыл фолликулы, увеличившись до 30 мм (фолликулярная фаза), затем остаются почти неизменными, и овуляция наступает лишь через 5 или более дней. У других фолликул овулирует при размере в 30 мм. Отдельные кобылы, у которых фолликул предовуляторного размера развивается во время диэструса, переходят в фолликулярную фазу с крупным, кажущимся предовуляторным фолликулом, который может овулировать в самом начале этой фазы или подвергнуться регрессии. Со временем овуляция происходит в связи с развитием нового фолликула.

Предварительное знание индивидуального размера предовуляторного фолликула у кобылы вносит ощутимый вклад в точность предсказания времени овуляции, так как из цикла в цикл у одной и той же кобылы фолликулы овулируют по достижении приблизительно одинакового диаметра.

Необходимо помнить, что преовуляторный диаметр обычно меньше, если два фолликула созревают одновременно.

Ежедневная ректальная и вагинальная пальпация в сочетании с данными ультразвукового исследования позволяют опытному ветеринару достаточно точно предсказать время наступления овуляции.

Довольно часто для стимуляции овуляции используются гормональные препараты. Наиболее распространенным методом является внутривенное введение 1500 ME человеческого хорионического гонадоропина (hCG), при наличии у находящейся в охоте кобылы размягченного фолликула диаметром минимум 35 мм с одновременным видимым на УЗИ отеком матки. Приблизительно у 85% кобыл овуляция наступает в интервале от 24 до 48 часов после введения гормона.

Большинство кобыл, задействованных в программе ИО, во время первичного осмотра находятся в фазе диэструса. Лютеолиз, при наличии в яичнике кобылы желтого тела возраста не менее 5 дней, можно вызывать введением аналогов простагландина. Если желтое тело старше 14 дней, оно так или иначе подвергнется регрессии; однако широко распространенной проблемой является удлинение лютеальной фазы, когда кобылы не приходят в охоту в ожидаемое время.

По этой причине предпочтение обычно отдают использованию простагландинов для стимуляции охоты (по сравнению с ожиданием спонтанного наступления эструса). Овуляция обычно происходит на 8-10-й день после инъекции, однако этот интервал может в значительной степени варьироваться. Несмотря на то, что применение простагландинов помогает сэкономить время и делает ненужными многократные повторные исследования кобылы, неправильное использование этих препаратов чревато появлением ряда проблем.

• Лечение может быть начато на слишком ранней стадии лютеальной фазы, до того как желтое тело, сформировавшееся на месте последнего овулировавшего фолликула, достигнет возраста 5 дней. В этих случаях регрессия желтого тела не происходит.

• Введение лютеолитического препарата при наличии фолликула диаметром более 30 мм делает затруднительным определение времени овуляции. В некоторых случаях такой фолликул начинает быстро расти и овулирует через 3 дня, в других — останавливается в развитии и постепенно подвергается регрессии. После этого овуляция может задержаться дней на 10 в зависимости от того, как быстро созреет один из мелких фолликулов.

• Если во время введения простагландина у кобылы имелся очень большой, свыше 35 мм фолликул, его овуляция может произойти еще до того, как появятся признаки половой охоты.

• В связи с этим при наличии крупных фолликулов следует отказаться от использования простагландина.

• Если же все-таки препарат был введен кобыле, не пытайтесь осеменять ее по этому циклу.

• Перед применением простагландина желательно тщательно исследовать яичники — во-первых, чтобы удостовериться, что кобыла находится в диэструсе; во-вторых, чтобы определить возраст наиболее молодого желтого тела, и, в-третьих, чтобы измерить диаметр самого крупного из имеющихся фолликулов.

В идеальном варианте владельца жеребца-производителя извещают за 48 часов до желаемого времени осеменения.

Любое заявление для получения разрешения на вывоз семени следует подавать заблаговременно до желаемой даты осеменения.

Аккуратное определение времени предстоящей овуляции имеет огромное значение в связи с тем, что оптимальное время для осеменения охлажденным семенем составляет 24 часа до овуляции. При несоблюдении этого интервала оплодотворяемость существенно ниже. Он короче, чем при использовании свежевзятого семени или при естественной случке. Нельзя сказать, что оплодотворения точно не произойдет при увеличении этого интервала. Однако следует учитывать, что различное качество семени от разных производителей, использование различных разбавителей и систем охлаждения обусловливают значительные колебания выживания спермиев не только во время хранения, но и при нахождении в половом тракте кобылы.

Гормональная стимуляция овуляции в период эструса

Так как наиболее трудным этапом искусственного осеменения в коневодстве является определение оптимального времени для осеменения, для стимуляции овуляции часто используют гормональные препараты. Наиболее распространенным методом является внутривенное введение 1500 международных единиц человеческого хорионического гонадоропина (hCG), при наличии у находящейся в охоте кобылы размягченного фолликула диаметром минимум 35 мм. Приблизительно у 85% кобыл овуляция наступает в интервале от 24 до 48 часов после введения гормона.

Новый аналог hCG — дезорелин, выпускаемый в форме имплантанта, — обещает быть эффективным для стимуляции овуляции во время эструса. От человеческого хорионического гонадотропина дезорелин отличается низким молекулярным весом, и поэтому (а также благодаря его сходству с эндогенным гонадотропином [GnRH]) повторное применение этого препарата вряд ли вызовет образование антител, как это происходит при использовании hCG. Проведенные ранее испытания подтверждают это предположение. Дезорелин вызывает выброс значительного количества лютеинизирующего гормона (LH) в течение 6 дней после введения имплантанта. И хотя характер повышения уровня LH отличается от естественного его выброса, тем не менее происходит эффективная стимуляция овуляции в пределах 48 часов после введения имплантанта. Как и при использовании hCG, данный препарат применяют, только если имеется фолликул диаметром свыше 30 мм.

Дезорелин имеет по крайней мере два преимущества перед hCG: его можно применять повторно без риска формирования резистентности, к тому же он более устойчив по сравнению с hCG. Последний приходится восстанавливать из сухого порошка, а неиспользованные остатки либо выбрасывать, либо замораживать. К сожалению, дезорелин — довольно дорогой препарат, в 5 раз дороже hCG.

Техника искусственного осеменения

Проводят идентификацию кобылы, сверяясь с паспортом или аналогичным документом. Проверяют сопроводительную документацию на семя, в которой должно быть указано, что жеребец прошел весь объем необходимых исследований. Если семя ввезено из-за рубежа, в документах должно быть указано, что жеребец является серонегативным по вирусному артерииту.

В документах на каждую партию семени должна также содержаться информация о дате времени взятия, подвижности, концентрации, типе и объеме использованного разбавителя.

Ветеринарный врач, проводящий осеменение, должен подтвердить факт получения семени, а также после проведения идентификации кобылы подтвердить, что ее описание соответствует тому, что имеется в заключенном соглашении. В дальнейшем он должен также будет подтвердить, что только присланное семя было использовано для осеменения только одной этой кобылы, а неиспользованные его остатки подверглись утилизации.

Кобылу готовят к осеменению в чистом, хорошо освещенном помещении. Предпочтение следует отдать осеменению в станке. Хвост бинтуют и отводят в сторону от промежности. Вульву и промежность тщательно очищают и высушивают.

Вплоть до этой стадии контейнер с охлажденным семенем должен оставаться закрытым. Охлажденное семя не следует подогревать. Так как между окончанием подмывания кобылы и непосредственно осеменением проходит некоторое время, рекомендуется, еще до всех этих манипуляций, очистить прямую кишку кобылы во избежание последующего загрязнения.

Настоятельно рекомендуется все полученные дозы семени использовать немедленно по их прибытии.

Хотя многие заводчики высылают семя с расчетом на два осеменения с интервалом 12 часов между ними, не следует хранить семя в контейнере для возможного дальнейшего использования (на случай, если не произойдет овуляции). Дело в том, что яйцеводы (фаллопиевы трубы) кобылы представляют собой гораздо лучшее хранилище для спермиев, нежели любые транспортные контейнеры. К тому же первое осеменение может вызывать той или иной степени воспалительную реакцию, и каждое последующее осеменение это воспаление усиливает. В настоящее время общепринятое мнение сводится к тому, что все семя из эквитейнера следует использовать сразу же по прибытии — в противоположность к бытовавшей ранее склонности осеменять повторно через 24 часа оставшейся в контейнере дозой на случай, если овуляция не произошла в срок. Кобыла является гораздо лучшим «инкубатором» для сперматозоидов, чем любое изобретенное человеком приспособление. И в самом деле, нередки случаи, когда кобылы оказывались жеребыми при овуляции через 4, 5, 6 и даже 7 дней после осеменения. Такая вероятность гораздо ниже, если бы семя было охлажденным, пусть даже в эквитейнере, так как большинство спермиев теряют подвижность (и, скорее всего, оплодотворяющую способность, или просто погибают) через 60 часов после взятия семени. При температуре чуть ниже 20°С происходят изменения в акросомах спермиев, а хранение при 4″С значительно снижает переживаемость. Именно поэтому рекомендуется проводить осеменение охлажденным семенем не более чем за 24 часа до овуляции. Нельзя сказать, что оплодотворения точно не произойдет при увеличении этого интервала. Однако здесь следует учитывать, что различное качество семени от разных производителей, использование различных разбавителей и систем охлаждения обусловливают значительные колебания выживания спермиев не только во время хранения, но и при нахождении в половом тракте кобылы.

Семя осторожно перемешивают и помещают в стерильный пластиковый шприц (без резинового поршня). К шприцу присоединяют стерильную пипетку для осеменения. Оператор надевает стерильную акушерскую перчатку.

Иногда необходимо нанести на пальцы небольшое количество стерильной, не обладающей спермицидными свойствами смазки.

Придерживая кончик пипетки позади указательного пальца, вводят руку в вульву кобылы. В наружное отверстие шейки матки вводят указательный палец и по нему осторожно направляют катетер в цервикальный канал. Очень важно, чтобы катетер достиг середины или краниального отдела тела матки, а не застревал в шейке. Провести катетер через цервикальный канал иногда бывает не так просто, как это может показаться. Не следует также довольствоваться помещением катетера непосредственно впереди шейки матки. Осторожно опорожняют шприц, вводя семя в полость матки. Если введение семени встречает сопротивление, катетер немного смещают назад.

Существует общепринятое мнение, что, если объем вводимого семени находится в пределах 0,5-60 мл, сам по себе этот объем значения не имеет, поэтому не стоит пытаться увеличить перед осеменением объем замороженного семени, расфасованного в небольшие контейнеры. Более того, использование неподходящего разбавителя для замороженного семени может приводить к плачевным результатам.

Важно, чтобы все используемые инструменты были прогреты во избежание температурного шока. Небольшое количество семени подогревают и проверяют на подвижность и наличие патологических форм.

Исследование кобылы после осеменения

Кобылу исследуют (если она была осеменена до овуляции) через 12 часов (при использовании замороженного семени), через 24 часа (при использовании охлажденного семени) или через 48 часов (при осеменении свежевзятым семенем). Если время овуляции было определено неверно, возможно, придется заказывать вторую дозу семени.

Воспалительная реакция

Не следует полагать, что осеменение достаточным количеством живых сперматозоидов в оптимальный по отношению к овуляции срок автоматически обеспечит жеребость. Осеменение вызывает острую воспалительную реакцию, которую необходимо рассматривать как естественное и благоприятное явление. Причиной прохолостов у многих, в особенности старых кобыл является недостаточное очищение матки от воспалительного экссудата. Наиболее острую воспалительную реакцию вызывают сами сперматозоиды.

Воспалительная реакция на семя

Сперма, вводимая непосредственно в матку, как при естественной случке, так и при искусственном осеменении вызывает эндометрит.

Считается, что сперматозоиды со временем попадают из матки в маточные трубы без участия каких-либо сокращений маточной стенки. Однако именно сокращениями миометрия можно объяснить довольно быстрое после осеменения попадание спермы в яйцеводы.

Все это подразумевает необходимость специальной обработки кобыл после осеменения.

Семя вводится непосредственно в матку кобыл при естественной случке или искусственном осеменении. Это означает, что бактериальные примеси и компоненты спермы, наряду со случайными примесями, контаминируют матку, вызывая воспалительную реакцию. Ранее считалось, что эта реакция провоцируется только бактериями, случайно попадающими в матку в процессе осеменения. Однако в настоящее время признанным является тот факт, что острое воспаление вызывают именно сперматозоиды, а не микрофлора. Определенную роль в этом воспалении играет также семенная плазма.

Первыми появляющимися в матке продуктами воспаления являются нейтрофилы (полиморфноядерные лейкоциты), которые можно обнаружить уже через 30 минут после осеменения [13]. Маточные железы вырабатывают жидкость, которая обладает хемоаттракантными свойствами по отношению к полиморфноядерным лейкоцитам [2], Считается, что хемоаттракантом для этих лейкоцитов здесь служит круциальный комплемент, хотя и другие разновидности комплемента могут обладать этими свойствами [1, 2, 3]. В настоящее время считают, что сперматозоиды инициируют хемотаксис нейтрофилов путем активации комплемента [26]. То, что сами сперматозоиды обладают хемотаксисом по отношению к конским нейтрофилам, позволяет предположить, что кратковременное воспаление матки в ответ на введение спермы является воспалением физиологическим, способствующим очищению матки от избытка спермиев, семенной плазмы и случайно попадающих загрязнений. Поврежденные спермин фагоцитируются полиморфноядерными лейкоцитами в первую очередь. У здоровых кобыл воспалительная реакция достигает своего пика к 10-12 часам и снижается к 24-36 часам после осеменения.

У большинства кобыл этот временный эндометрит проходит через 24-72 часа, и таким образом в полости матки создаются условия, пригодные для развития эмбриона. Важно понимать, что этот эндометрит является именно физиологическим, а не патологическим состоянием и представляет собой скорее нормальную физиологическую реакцию, направленную на очищение матки от остатков спермы, семенной плазмы и продуктов воспаления до того, как через 5,5 дней после оплодотворения из яйцеводов в полость матки опустится эмбрион.

Однако если эндометрит продолжается после 4-го или 5-го дня диэструса, то помимо того, что в матке создаются несовместимые с развитием эмбриона условия, преждевременный выброс простагландина F-2-альфа вызывает лютеолиз, быстрое снижение уровня прогестерона и раннее возвращение в эструс. Эти кобылы относятся к группе так называемых подверженных, или склонных к развитию перситентных эндометритов [2). В целом снижение устойчивости к эндометритам бывает обусловлено старостью или большим количеством родов. Подверженность эндометритам не является неизменным состоянием, так как нарушение механизмов защиты матки обусловлено лишь замедлением процесса элиминации инфекции. В практике мы встречаемся с широким спектром устойчивости или восприимчивости к эндометритам, и не следует думать, что всех кобыл можно разделить на две категории — «восприимчивые» и «устойчивые». Изучение иммуноглобулинов, опсонинов и функциональной активности нейтрофилов в матке у подверженных эндометритам кобыл не подтвердили наличия нарушений иммунитета [3]. Эванс с соавторами [9] впервые предположили, что снижение механического дренажа играет роль в повышении восприимчивости к эндометритам. Сейчас известно, что способность матки к механической элиминации бактерий, продуктов воспаления и жидкости является критическим фактором в механизме защиты. И, как логический вывод, — любое нарушение этой функции, т. е. снижение сократимости миометрия, делает кобылу склонной к развитию упорных эндометритов [21]. Механизм нарушения сократительных свойств миометрия у восприимчивых кобыл остается невыясненным. Недавно было высказано предположение о возможном нарушении регуляции мышечных сокращений со стороны нервной системы [25]. Развивающееся в результате скопление жидкости может быть обусловлено нарушением оттока через цервикальный канал или же снижением реабсорбции через лимфатические сосуды. Такое снижение лимфодренажа, возможно, играет существенную роль в развитии персистентных эндометритов после осеменения, причем интересно, что в биопсийном материале эндометрия от восприимчивых кобыл обычно находят лимфатические лакуны (признак лимфостаза) [16].

На такое взаимодействие между маткой и вводимым семенем может оказывать влияние ряд факторов.

• Объем вводимого семени.

• Концентрация.

• Вид разбавителя.

• Количество мертвых спермиев.

• Свойства семенной плазмы.

Как показали исследования Kotailen с соавт. (1994), интенсивность воспалительной реакции зависит от концентрации и/или объема вводимого семени: так, высокая концентрация (т. е. осеменение замороженной спермой) вызывает более сильную реакцию в матке, чем осеменение свежевзятым или разбавленным семенем.

В недавних работах Nikolakopoulos and Watson (2000) было обнаружено, что содержание в матке нейтрофилов было тем выше, чем меньшее количество спермы вводилось. Однако в связи с тем, что в данных исследованиях использовались несколько большие объемы, не исключено, что значительные объемы семени терялись при цервикальном рефлюксе. Кроме того, кобыл исследовали на содержание нейтрофилов не ранее 48 часов после осеменения, и возможно, что к тому времени пик воспалительной реакции уже прошел [2, 3].

При условии, что концентрация семени не ниже 25X10 в шестой степени в мл, объем сам по себе не имеет большого значения. Следует лишь избегать избыточного разбавления семени, приводящего к снижению концентрации: в этих случаях значительный объем спермы выбрасывается в результате цервикального рефлюкса, что грозит снижением оплодотворяемости.

Вывод о том, что интенсивность воспалительной реакции после осеменения зависит именно от свойств самого семени, а не разбавителя, сделан Parleviet с сотрудниками, которые определяли степень воспаления после осеменения свежевзятым семенем, а также разбавленным, используя различные разбавители.

Воспалительная реакция матки одинакова на живые и мертвые спермин [14],

Синдром «возрастной неслучавшейся кобылы»

Возрастные неслучавшиеся кобылы представляют особый случай, требующий специального подхода, так как весьма часто они оказываются склонны к развитию эндометритов после осеменения, несмотря на то, что ранее никогда не были в случке. Нередко спортивные кобылы начинают использоваться в воспроизводстве только в возрасте старше 10 лет. Иногда бывает очень трудно заставить такую кобылу зажеребеть. Эти кобылы обычно имеют ряд сходных симптомов, составляющих данный синдром. При биопсии обнаруживают дегенеративные изменения в железистом эндометрии и фиброз стромы (эндометриоз) — возрастные изменения развиваются несмотря на то, что эти кобылы никогда не осеменялись. Другим общим симптомом у этих возрастных кобыл является скопление жидкости в матке. Шейка матки у них нередко оказывается плотно закрытой и не расслабляется во время эструса, поэтому жидкость не оттекает, а накапливается в полости матки. Во многих случаях эта жидкость не содержит микрофлоры и нейтрофилов. Однако сразу после осеменения ситуация усугубляется из-за недостаточного лимфатического оттока и пониженной сократимости миометрия на фоне закрытой шейки матки. Количество внутриматочной жидкости может варьироваться от нескольких мл до литра и более в самых экстремальных случаях. Для повышения оплодотворяемости у этих кобыл ветеринарный врач должен иметь хорошее представление об этой разновидности патологии матки и шейки. Слишком часто владельцы полагают, что от этих кобыл можно ожидать такой же зажеребляемости, как и от молодых не-случавшихся кобыл. И очень важно бывает убедить владельца в том, что возрастная кобыла может представлять проблему в воспроизводстве. Этих кобыл следует рассматривать как крайне восприимчивых к эндометритам и принимать соответствующие меры.

Жидкость в полости матки

При ультразвуковом исследовании через 12-24 часа после осеменения в матке нередко обнаруживают скопление жидкости, которую для получения максимальной оплодотворяемости следует удалять. Препаратом выбора здесь является окситоцин и в отдельных случаях бывает показано интраутеральное введение антибиотиков. Не так давно было установлено, что лечение такого недостаточного очищения матки лучше проводить во время осеменения, а не ждать овуляции. Эти кобылам проводят лаваж большими объемами теплого физиологического раствора в сочетании с инъекциями окситоцина. Кобылам с крупными лимфатическими лакунами показано также лечение простагландином. Необходимо также оценивать строение промежности и при необходимости делать операцию Каслика.

Ранняя диагностика жеребости

Определение жеребости следует проводить как можно раньше при помощи ультразвуковой диагностики, лучше на 14-15-й день после осеменения.

Заключение

Успех воспроизводства зависит от плодовитости жеребца, плодовитости кобылы и условий ведения коневодства. Получаемый жеребенок является суммарным продуктом взаимодействия всех этих факторов.

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

1. Allen W. Е. (1991) Investigations into the use of oxytocm for promoting uterine drainage n mares susceptible to endometritis. Vet. Rec. 128, 593.

2. Allen W, E. and Pycock J. F (1988) Cyclical accumulation of uterine fluid in mares with lowered resistance to endometritis. Vet. Rec. 122, 489.

3. Allen W. E. and Pycock J. F. (1989) Current views on the pathogenesis of bacterial endometritis in mares with lowered resistance to erdometritis. Vet. Rec. 125, 298.

4. Bader H. (1982) An investigation of sperm migration into the oviducts of the mare. J Reprod Fert Sjppl. 32, 59.

5. Bnnsko S. P., Varner D. D., Blanchard T. L, and Meyers S. A. (1990) The effect of post-breeding uterine lavage on pregnancy rates in mares. Thenogenol. 33, 465

6. Brinsko S. P., Varner D. D. and Blanchard T. L. (1991) The effect of uterine lavage performed four hours postinsemination en pregnancy rates in mares. Theriogenol. 35,1111.

7. Cadano M. E., Thatcher M.-J. D. and LeBlanc M. M. (1995) Relationship between pros-taglandin and uterine clearance of radiocolloid in the mare. Bid. Reprod. Mono. 1, 495

8. Combs G. В., LeBlanc M. M., Neuwirth L. etal. (1996) Effects of prostaglandin F2clopro-stenol and fenprostalene on uterine clearance of radiocolloid in the mare. Theriogenology 45,1449.

9. Evans M, J., Hamer J. M., Gason L. M. et al. (1986) Clearance of bacteria and non antigenic markers following intrauterme inoculation into maiden mares: effect of steroid hormone environment. Theriogenology 26, 37.

10. Farrelly B. Y. and Mullaney P. E. (1964) Cervical and uterine infections in thoroughbed mares. Irish vet. J. 18, 210.

11. Gutjahr S., Paccamonti D., Pycock J. F., van der Weijden G, C. and Taverne M. A. M. (1998) Intrauterine pressure changes in response to oxytocin application in mares. Reprod dom. Anim, Suppl. 5,118.

12. Hughes J. P. and Loy R. G. (1969) Investigations on the effect of intrauterme inoculations of Streptococcus zooepidemicus in the mare. Proc. 15th Am. Ass. egume Practnrs. 289.

13. Katila T. (1995) Onset and duration of uterine inflammatory response of mares after insemination with fresh semen. Biol. Reprod. Mono. 1, 515.

14. Katila T. (1997) Interactions of the uterus and semen. Pferceheilkunde 13, 508

15. Katila T. (2001) Sperm — Uterine Interactions: a review. Animal Reprod. Science 68,267.

16. Kenney R. M. (1978) Cyclic and pathologic changes of the mare endometrium as detected by biopsy, with a note on early embryonic death. J. Am. vet. med. Ass. 172, 24

17. Knudsen 0. (1964) Partial dilatation of the uterus as a cause of sterility in the mare. Cornell Vet. 54, 423.

18. Krutti В., Pycock J F., Paccamonti D. etal. (1997) The influence of early post-breeding uterine lavage on uterine fluid accumulation in the mare highly susceptible to acute endometritis (abstr). Pferdeheilkunde 13, 545.

19. Knutti В., Pycock J. F., van der Weyden G. C. and Kupfer U. (2000) The influence of early postbreeding uterine lavage on pregnancy rates in mares with intrauterine fluid accumulations after breeding. Eguine vet. Educ 12, 267.

20. Kotilainen Т., Huhtinen M. and Katila T. (1994) Sperm-induced leukocytosis in the equine uterus. Theriogenology 41, 629.

21. LeBlanc M. M. (1994) Oxytocin -the new wonder drug for treatment of endometritis? Equine vet. Educ. 6, 39.

22. LeBlanc M. M. (1997) Effects of oxytocin, prostaglandin and phenylbutazoie on uterine clearance of radiocolloid. Pferdeheilkunde 13, 483

23. Le3lanc, M. M., Neuwirth L., Mauragis D.e:al (1994) Oxyxcin enhances с earanceof radiocolloid from the uterine lumen of reproductively normal mares and mares susceptible to endometritis. Equine vet J. 26, 279.

24. LeBlanc M M.Johnson R. D., Calderwood Mays M.B. etal. (1995) Lymphatic clearance of India ink in reproductively normal mares and mares susceptible to endometritis. Biol. Reprod. Mono. 1, 501.

25. Liu I. K. M., Rakestraw P., CoitC. et at (1997) An in vitro investigation of the mechanism of neuromuscular regulation in myometrial contractility (abstr). Pferdeheilkunde 13, 557.

26. Madill S., Troedsson M. H. Т., Alexander S. L, Shand N., Santschi E. M., Irvine С. Н. G. (2000) Simultaneous recording of pituitary oxytocin secretion and myomertiral activity in oestrous mares exposed to various breeding stimuli. J. Reprod. Fert (Suppl.). 56,351.

27. Newcombe J R. (1997). The effect of the incidence and depth of mtra-utenne fluid in early dioestrus on pregnancy rates in mares (abstr.). Pferdeheilkunde 13, 545

28. Paccamonti D. L., Gutjahr S., Pycock J. F. et al. (1997) Does the effect of oxytocin on ntrauterine pressure vary with dose or day of treatment (abstr). Pferdeheilkunde 13, 553.

29. Paccamonti D. L, Pycock J. F., Taverne M. A. M. et al. (1999) PGFM response to exogenous oxytocin and determination of the half-life of oxytocin in nonpregnant mares. Equine vet. J. 31,285.

30. Parlevliet J. M., Tremoleda J M., Cheng F.P. et al. Influence of semen, extender and seminal plasma on the defence mechanism of the mare’s uterus (abstr.). Pferdeheilkunde 13, 540.

Оставить комментарий

avatar
Photo and Image Files
 
 
 
Audio and Video Files
 
 
 
Other File Types
 
 
 
  Подписаться  
Уведомление о