В. Ф. КУЗНЕЦОВ, И. А. ДОМСКИЙ, О. М. БУХАРИН, М. В. МИЛЮТИН, И. С. БЯКОВ, Н. Л. НЕГОДЯЕВА
Точные знания патогенеза инфекционных болезней позволяют найти правильные и рациональные пути их лечения и профилактики.
Изучение инфекционного процесса в естественных условиях ограничено, так как варьирует инфицирующая доза возбудителя, не известны точные сроки инкубационного периода, возможно наслоение вторичной инфекции и т. д. Поэтому целесообразно исследовать патогенез в эксперименте.
Патогенез чумы плотоядных включает закономерности формирования воспалительных и дегенеративных процессов в разных органах и тканях, демиелинизирующих изменений в нервной системе [3—5]. Имеются данные об уменьшении количества эритроцитов и гемоглобина в крови инфицированных животных [8], которое может быть обусловлено наличием у возбудителя субстанций, например гемагглютининов, разрушающих их.
Однако изменения эритропоэза, а также физико-химические сдвиги в крови животных, проявляющиеся в нарушении процессов перекисного окисления липидов (ПОЛ) в динамике инфекционного процесса, изучены не достаточно.
Материалы и методы. Стандартных норок 7-месячного возраста экспериментально заражали вирулентным штаммом вируса чумы плотоядных Sheider Hill [6, 7, 10], который вводили внутримышечно в дозе 1000 ЛДбо/мл. У животных до заражения, а также на 8-й (в инкубационный период) и 13-й дни (клиническое проявление болезни) после введения вируса брали кровь (из хвоста), в качестве антикоагулянта использовали гепарин (50 ед/мл).
Определяли количество эритроцитов (камера Горяева) и концентрацию гемоглобина (гемиглобинцианидный метод), цветовой показатель (среднее количество гемоглобина в одном эритроците). В мазках крови, окрашенных азур-эозином, контролировали анизо- и пойкилоцитоз, полихроматофилию, которые отражают регенеративные сдвиги эритропоэза. Данные оценивали по обычным клиническим методикам, с помощью соответствующих наборов, а также спектрофотометра СФ-46 или микроскопа.
Содержание продуктов перекисного окисления липидов исследовали по методике И. А. Волчегорского и соавт. (1989) в гептан-изопропанольных экстрактах цельной крови. В верхнем (гептановом) слое с помощью спектрофотометра СФ-46 при длине волны 220, 232, 278 нм определяли соответственно экстинции ненасыщенных липидов, диеновых конъюгатов, кетодиенов и сопряженных триенов. Соотношения показателей 232 нм/220 нм, 278 нм/220 нм отражали содержание продуктов ПОЛ в крови. Данный биофизический тест давал интегральную характеристику уровней продуктов ПОЛ, которые отображали интенсивность процессов повреждения [1]. Достоверность выявленных сдвигов оценивали по t — критерию Стьюдента.
Результаты исследований и обсуждение. В ходе эксперимента в динамике установили сдвиги показателей эритропоэза и физико-химических параметров, свидетельствующие о нарастании тяжести инфекционного процесса при чуме плотоядных (табл.).
Количество эритроцитов и гемоглобина на 8-е сутки (инкубационный период) достоверно не изменялось, хотя имелась тенденция к их уменьшению. В этот период регистрировали достоверное снижение цветового показателя, что свидетельствовало об уменьшении среднего уровня гемоглобина в эритроцитах и, по-видимому, было связано с появлением в крови молодых эритроцитов (ретикулоцитов, полихроматофилов) с пониженной гемоглобинизацией. В мазках крови отмечали нарастание анизо- и пойкилоцитоза, а также полихроматофилии. На 13-е сутки в период проявления клинических признаков болезни наблюдали достоверное уменьшение цветового показателя, а также количества эритроцитов и концентрации гемоглобина, которые сочетались с признаками дегенерации и полихроматофилии. Эти сдвиги свидетельствовали о формировании гемолитической анемии, которая, вероятно, является следствием воздействия гемолизина возбудителя чумы плотоядных на эритроциты с последующим их внутриклеточным гемолизом в органах РЭС.
Важнейшим показателем, отражающим тяжесть патологического процесса, является увеличение в крови продуктов перекисного окисления ли- пидов [1]. Так, на 8-й день (явления анемии недостаточно выражены) отме чали увеличение содержания продуктов ПОЛ в цельной крови (диеновые конъюгаты, а также кетодиены и сопряженные триены). Эти сдвиги приводили к нарушению деятельности ферментативных комплексов мембранных структур клеток крови, ответственных за водно-электролитный гомеостаз эритроцитов, способствуя увеличению проницаемости мембраны для воды и в последующем вызывая анемию. К 13-му дню болезни количество эритро цитов и гемоглобина уменьшалось практически в 2 раза. Уровень продуктов ПОЛ в этот период не отличался от такового исходного фона, что свидетельствовало об ассоциированности продуктов ПОЛ с эритроцитами в крови.
Важнейшее проявление чумы плото ядных — воспалительные процессы, формирующиеся в почках и по ходу желудочно-кишечного тракта [3, 4]. Они клинически выражаются диареей, рвотой, полиурией или олигоурией и анурией. Данный комплекс симптомов закономерно проявляется в виде гипо гидратации либо гипергидратации, которые могут сочетаться со сдвигами натрия (гипо- или гиперосмолярные состояния) и кислотно-щелочного равновесия. Водно-электролитный дисбаланс еще в большей степени должен способствовать гемолизу эритроцитов и являться фактором патогенеза фор мирующейся анемии.
Описанные патогенетические измене ния представляют интерес для ветери нарных и медицинских работников, так как возбудитель чумы плотоядных имеет антигенное и генетическое род ство с вирусом кори [9]. Данную парамиксовирусную инфекцию можно рассматривать как экспериментальную модель кори человека [11].
Заключение: Гематологические и физико-химические сдвиги, установ ленные в крови, отражают тяжесть патологического процесса при чуме плотоядных. Наблюдаемые нами увели чения в цельной крови диеновых конъюгатов, кетодиенов и сопряженных триенов к 8-му дню болезни свиде тельствуют о повреждении эритроци тов. Следствием регенеративных про цессов в этот период является сниже ние гемоглобинизации эритроцитов. Выраженные проявления гемолитичес кой анемии, отмечаемые к 13-му дню болезни, формировались в результате действия гемолизина вируса чумы плотоядных на эритроциты. Анемия, повидимому, является следствием не соответствия внутриклеточного разру шения эритроцитов и их регенерации в костном мозге. Приведенные данные следует учитывать при осуществлении патогенетической терапии чумы плотоядных.
ЛИТЕРАТУРА
1. Владимиров Ю. А., Арчаков А. И. // Перекисное окисление липидов в биологических мембранах. — М., 1972.
2. Волчегорский И. А. и др. // Вопросы мед. химии. 1989. Т. 35. № 1.
3. Груздев К. Н., Селиванов А. В. // Чума плотоядных. — М., 1985.
4. Игнатов П. Е. // Ветеринария. 1994. № 2.
5. Панков В. А. и др. // Болезни пушных зверей. — М.: Колос, 1973.
6. Сулимов А. А. и др. // Тез. докл. II Всесоюзн. конф. — Киров, 1977.
7. Сулимов А. А. и др. // Сборник трудов ВГНКИ. — М., 1981.
8. Черкасский Е. С. // Чума и чумоподобные болезни плотоядных. — М.: Колос, 1971.
9. Феннер Ф. и др. // Биология вирусов животных. — М., 1977, Т. 1.
10. Gillespie J . H., Ricard С . G. // Amer. J. Vet. Res. 1956. 17.
11. Nagata T. et al. // J. Med. Primatol. 1990. 19. 2.